Что означает индекс пролиферативной активности ki 67 при раке молочной железы

Что означает индекс пролиферативной активности ki 67 при раке молочной железы

Маркер Ki-67 – один из важнейших показателей ракового процесса при обследовании. Уникальный белок – антиген – показывает деление клеток, которые в состоянии покоя не приводят к образованию вещества. Если при тесте на Ki-67 обнаруживается активность клеток, врачи могут диагностировать степень развития карциномы.

Что такое индекс пролиферации

Индекс выявляется при исследовании Ki-76 на экспрессию – это цифровой показатель активности опухолевых клеток. Если уровень экспрессии Ki-67 опухолевых клеток равен 22, это означает 22% активность. Чем выше показатель, тем активнее происходит размножение атипичных клеток и, следовательно, развитие рака.

При раке молочной железы маркер Ki-67 обнаруживается в тканях, взятых с помощью биопсии или в ходе операции по удалению опухоли. С его помощью оценивается геномная активность. Чаще всего этот протеин применяется для уточнения диагноза карциномы молочной железы. Однако использовать он может и для диагностики злокачественных процессов в других органах.

Показания и противопоказания

Обследование назначается при подозрении на агрессивное развитие новообразования

Обследование на Ки-67 при раке молочных желез назначают в таких случаях:

  • имеется подозрение на агрессивное развитие новообразования;
  • требуется определить эффективную методику карциномы;
  • нужно выявить эффективность лечения, а также риски рецидива после проведенной терапии;
  • нужно определить вторичные очаги в лимфатических узлах и органах;
  • требуется определить гормональный статус новообразования;
  • в организме обнаружены другие онкологические процессы.

У иммуногистохимии отсутствуют абсолютные противопоказания. Проводить процедуру нельзя только при острых состояниях, когда у пациентов увеличивается температура.

Особенности проведения ИГХ-исследования для выявления маркера

Для эксцизионной биопсии используют иглу с большим диаметром

Чтобы выполнить исследование Ki-67 при раке молочной железы у женщин и определить, в норме ли показатели, потребуется образец ткани. Его забирают с помощью специальных инструментов из подозрительного участка груди, используя следующие методы:

  • Аспирация иглой. Применяется очень тонкий инструмент, введение которого почти не чувствуется и процедуру выполняют без обезболивания.
  • Вакуумная биопсия. Врач применяет местный анестетик, вырезает микроскопический кусочек кожи и вводит зонд. Через разрез специалист получает несколько видов материала.
  • Эксцизионная биопсия. Для процедуры используется игла с большим диаметром, ткань берут цилиндрической формы под местным обезболиванием.
  • Хирургическая биопсия. При выполнении операции удаляется аномальная зона, часть полученного материала направляется на гистологическое исследование.

Результат анализов пациент получает уже через 10-12 суток.

Метод проведения биопсии не может выбираться пациенткой. Способ определяется исключительно врачом и стоит доверять ему без лишних вопросов.

Польза определения индекса Ki-67

Главная задача маркера Ki-67 – определить точный показатель выживаемости. Он успешно с этим справляется, так как точно определяется количество делящихся раковых клеток в опухоли. При высоком уровне можно говорить о стремительном делении клеток, что будет положительно оценено с точки зрения химиотерапии. Если же эти клетки делятся медленно, терапия не даст существенных результатов.

Методы определения значения маркера

Микроскопическое исследование ткани, которое основано на выявлении антител на патологические вещества

Маркер Ki-67 хорошо выявляет особенности опухолевого процесса. Проводят его на тканях опухоли при обязательном гистологическом исследовании обнаруженных новообразований. Также тест на маркер назначают при агрессивном увеличении опухолей.

Пациентки должны понимать, что положительные показатели Ki-67 указывают на высокий риск рецидива и худшую выживаемость даже на ранних стадиях патологии.

Для оценки результатов взятой биопсии применяют несколько методов исследования:

  • окрашивание клеток антигена Ki-67 – световые микроскопы помогают оценить визуально количество активных частиц;
  • применение антитела MIB1 для маркировки злокачественных клеток;
  • положительно окрашенные клетки опухолей среди общего числа позволяют сопоставить их процент относительно здоровых клеток;
  • результаты подсчитывают, учитывая все разделы опухоли.

Исследование маркера Ki-67 – это сложная диагностическая процедура. Иногда на биопсии у пациента берут несколько образцов, что позволяет точно определить уровень активности и количество атипичных опухолевых клеток. Для этого используются разные методы оценки.

Прогноз и сопоставление процентного соотношения

Корреляция между интегральными прогностическими индексами и Ki-67 в первичной опухоли и в метастазе лимфоузла

Результаты анализа пациенту выдаются обычно в определенном процентном соотношении. Оно указывает на содержание белка, с помощью которого можно определить тактику лечения. В норме Ki-67 не должен превышать 15%, тогда пациенту ставится благоприятный диагноз и шанс выживания свыше 90%. Чем выше процент Ki-67, тем хуже обстоят дела:

  • если Ki-67 равен 10% и меньше, то в 95% случаев после операции срок выживаемости будет более 10 лет;
  • при показателе Ki-67 15% в 95% случаев женщины проживают больше 5 лет, в России этот показатель может быть равен 85% случаев;
  • при Ki-67 в 20% устанавливается рак молочной железы с активностью новообразования, если лечение начать сразу же, прогноз будет благоприятным, при отказе высок риск прогрессирования болезни и сокращения жизни до 3-5 лет;
  • если Ki-67 равен 30% — это указывает на активное развитие и увеличение карциномы в размерах, однако она хорошо будет поддаваться химиотерапии;
  • если Ki-67 равен 90%, врачи могут отказаться от лечения – выживаемость в течение 5 лет равна нулю.
Читайте также:
Почему болит в грудине и ком в горле и что это может быть

При самом высоком показателе Ki-67 женщины, как правило, редко живут дольше 3 лет.

Рак молочной железы с повышенной гормональной зависимостью – очень распространенное заболевание. Оно складывается из ряда факторов, провоцирующих болезнь: беременность, половое созревание, кормление грудью, а затем и предклиматерический период связаны с сильным колебанием гормонов. Прогестероны и эстрогены колоссальным образом воздействуют на женский организм, способствуя неблагоприятному состоянию.

Спровоцировать изменение в груди могут и другие факторы: лечение гормональными средствами в больших дозировках, отсутствие беременностей в течение жизни или бесплодие. Однако это не значит, что рак у нерожавших женщин случается чаще. Прямой связи с беременностями или их отсутствием не существует.

Что делать при плохом диагнозе

При обнаружении последней стадии рака очень важно получить поддержку от родных и близких

При выдаче результатов на руки специалисты лаборатории не дают никаких рекомендаций и пояснений. Однако женщины выясняют значение анализов в интернете. Затем диагноз подтверждается врачом. Далеко не все случаи считаются пригодными для лечения. Это вызывает огромный стресс и тревогу у женщин.

Важно понимать, что даже при обнаружении последней стадии рака молочной железы жизнь не заканчивается в эту же секунду. Многие люди живут больше 1-2 лет. И это время следует потратить на любимых людей, если остаются силы и вера.

Очень важна поддержка близких в этот период, а также контакты с женщинами в таком же состоянии. Нередко группы поддержки тяжелобольных помогают справиться с высоким уровнем тревоги, проработать страхи и подготовиться к окончанию жизненного пути.

Спорные вопросы теста

При получении плохого результата важно помнить, что высокий уровень экспрессии указывает на то, что опухоль будет хорошо поддаваться химиотерапии. Если сразу же начать лечение и потом пройти повторную диагностику, есть все шансы на существенное улучшение состояния. Результаты тестов на Ки-67 иногда не могут быть интерпретированы точно, если патология связана с положительными лимфатическими узлами.

Определение маркера Ki-67 назначается в спорных случаях, когда есть все причины предполагать наличие рака у пациентки. Также обследование проводят, когда рак установлен, но нужно определить его активность и подобрать лучшую тактику терапии.

Кi67 при раке молочной железы: 30 лет и старше

Наиболее часто рак молочной железы диагностируется после сорока лет, но встречаются более ранние случаи заболевания – в подростковом возрасте, в возрасте 20-30 лет. Исследования на рак проводятся с помощью специальных тестов. Кi67 – это белок, который служит маркером разрастания тканей опухоли при делении клеток. Во время проведения исследований Кi67 обнаруживают только в делящихся клетках. Белок Кi67 указывается в процентах – чем больше процентное содержание, тем выше пролиферативная активность опухоли. Высокое содержание белка указывает на высокий риск метастазирования новообразования, рецидива заболевания. Тест с помощью Кi67 проводят при подозрении на рак молочной железы и другие злокачественные опухоли.

В онкологической клинике Юсуповской больницы пациентки с подозрением на рак молочной железы могут получить консультацию опытного врача-онколога, пройти обследование, лечение заболевания. Онкологическое отделение оснащено современным диагностическим оборудованием, которое позволяет диагностировать рак на ранней стадии развития. Врач направляет пациентку на проведение определенных тестов и анализов. В больнице проводят лечение с помощью химиотерапии, радиотерапии, лучевой терапии. Маркер Ki67 помогает вовремя определить риск развития рецидива – опухоль может появиться в других органах, в области операционного шва, в лимфатических узлах. Показатель белка при развитии рецидива указывает на особенности опухолевого процесса – если процентный показатель белка выше, чем в первичной опухоли, то вторичная опухоль считается агрессивным новообразованием.

Кi67 при раке молочной железы: 30 лет и старше

Норма

Наиболее применяемым иммуногистохимическим тестом считается тест на определение белка Кi67, являющегося антигеном в ядре клеток во всех циклах, кроме GO. Определение процентного содержания белка позволяет своевременно выявлять развитие риска рецидива рака молочной железы, заменять препараты химиотерапии, которые не показывают высокой эффективности. Исследования на процентное содержание белка проводится на материалах опухоли взятых с помощью биопсии. Ki 67 невозможно определить при обыкновенном гистологическом исследовании, такие исследования выполняются при проведении диагностики во время деления клеток. Диагностическое исследование назначают при подозрении на высокую агрессивность опухоли, для контроля опухолевого процесса и выявления риска рецидива, для выбора эффективного лечения новообразования. Показатели нормы белка говорят о благоприятном прогнозе заболевания.

Прогноз

Существуют определенные показатели содержания белка, которые определяют тактику лечения. Норма Кi 67 составляет до 15 % – это говорит о благоприятном прогнозе выживаемости. Прогноз выживаемости зависит от показателей процентного содержания белка Кi 67:

  • Ki 67 менее 10% – прогноз благоприятный для 95% женщин. При увеличении показателя от 10% до 15% пятилетний рубеж преодолевают 85% пациенток.
  • Норма составляет до 15% содержания белка – прогноз благоприятный, применяется гормонотерапия.
  • Ki 20% при раке молочной железы – это показатель активности развития новообразования. Прогноз при своевременно начатом лечении благоприятный.
  • Ki 67 составляет 30% – карцинома активно растет, хорошо отзывается на лечение с помощью химиотерапии. Ки 67 высокий при раке молочной железы – это показатель хорошей реакции на препараты химиотерапии клеток опухоли во время активного роста.
  • Ki 67 90% – выживаемость равна нулю, прогноз неблагоприятный.
Читайте также:
Саркома грудной железы: карциносаркома, радиационно-индуцированная ангиосаркома

Рак молочной железы – это распространенное заболевание, которое очень часто связано с повышенной гормональной активностью организма женщины. Период полового созревания, беременности, кормления грудью, предклимактерический – это периоды активного воздействия гормонов на железистую ткань груди, характеризующиеся изменениями в тканях молочной железы. Такие же изменения в тканях может вызывать длительное лечение большими дозами гормонов, отсутствие беременности у женщин старше 35 лет, бесплодие.

Ежегодно следует проходить осмотр у врача гинеколога женщинам до 35 лет, женщинам старше 35 лет следует посещать гинеколога два раза в год. Раз в год женщины старше 40 лет должны проходить маммографическое исследование. При появлении симптомов неблагополучия: изменения цвета и структуры кожи груди, втянутости соска, боли, дискомфорта следует посетить врача-маммолога или онколога. В Юсуповской больнице пациентки смогут пройти все необходимые исследования. В онкологическом отделении проводится диагностика злокачественных заболеваний молочной железы, лечение и реабилитация больных.

Роль маркера Ki-67 в определении прогноза при раке молочной железы

Для цитирования: Лазукин А.В. Роль маркера Ki-67 в определении прогноза при раке молочной железы. РМЖ. 2013;1:28.

Реферат. Анализируются возможности маркера клеточной пролиферации Ki-67 для оценки пролиферативной активности опухоли, прогноза течения заболевания и решения вопроса о дополнительном лекарственном лечении новообразования.

Ключевые слова: пролиферативная активность, рак молочной железы, Ki-67, адъювантная и неоадъювантная химиотерапия, прогноз.
Прогностическая роль Ki-67 при назначении адъювантной химиотерапии
Для оценки пролиферативной активности опухоли применяются различные подходы, включая подсчет фигур митозов в поле зрения, использование меченных нуклеотидов и оценку сигнала от препарата, встроившегося в структуру ДНК, а также проточную цитофлуометрию фракции клеток, находящихся в S-фазе [7, 23, 24]. Однако наиболее практически применимым методом является иммуногистохимическое определение Ki-67 – антигена в ядре клеток во всех фазах клеточного цикла, кроме G0 [11].
Однако, несмотря на большое количество исследований, направленных на установление связи между уровнем Ki-67 и предполагаемой терапевтической тактикой, в настоящее время нет единого мнения по поводу прогностической роли Ki-67 при раннем раке молочной железы (РМЖ) [28]. В метаанализ, проведенный Urruticoechea и соавт., были включены результаты 18 клинических исследований, в которых приняли участие более 200 пациенток. В 17 из 18 исследований была выявлена статистически достоверная корреляция между экспрессией Ki-67 и прогнозом РМЖ, однако в данных исследованиях не было единого референсного уровня Ki-67, таким образом, нет достоверных критериев отличия повышенного и низкого уровня антигена [25]. В описанных исследованиях верхней границей пониженного уровня Ki-67 являлись значения от 1 до 28,6%, что несколько снижает клиническую ценность определения данного маркера [15, 25].
Исследования American Society of Clinical Oncology (ASCO) Tumor Marker Guidelines Committee показали, что в настоящее время достоверных доказательств прогностической значимости определения Ki-67 в клинической практике недостаточно, чтобы рекомендовать рутинное определение Ki-67 для прогноза у пациентов с впервые диагностированным РМЖ [15].
Клиническая значимость определения Ki-67 для прогноза адъювантной терапии РМЖ может быть повышена, если выделить определенные группы опухолей, в которых данный маркер может быть применим, либо Ki-67 должен определяться в качестве одного из параметров панели биомаркеров. Например, Cuzick J. и соавт. предлагают использовать иммуногистохимическую панель, основанную на определении четырех маркеров, таких как рецепторы эстрогенов, рецепторы прогестерона, HER2/neu, а также Ki-67 [3].
По данным других исследовательских групп, определение Ki-67 может являться важным этапом прогностического алгоритма относительно риска рецидива у пациенток, страдающих ранним РМЖ и получающих летрозол или тамоксифен в качестве адъювантной терапии [26].
Однако в литературе имеются наблюдения и о предиктивной роли Ki-67 при назначении химиотерапевтического лечения. Согласно результатам рандомизированного клинического исследования PACS01, в группе пациенток с эстроген-позитивными опухолями и высоким индексом Ki-67 целесообразно добавление доцетаксела к эпирубицину и 5-фторурацилу в качестве адъювантной химиотерапии [18]. Указанные результаты были подтверждены в исследовании Cancer International Research Group 001 trial [16]. Однако эти результаты не соответствуют данным International Breast Cancer Study Group Trials VIII and IX. В этих исследованиях была показана предиктивная роль высокого уровня экспрессии Ki-67 в группе с рецептор-позитивным РМЖ без признаков заболевания в лимфатических узлах по отношению к проведению адъювантной терапии с включением мето­трексата, циклофосфамида и 5-фторурацила в дополнение к проводимой эндокринной терапии [27]. Таким образом, важно проведение исследований, направленных на выделение групп пациенток с высокими показателями Ki-67, которые смогут получить максимальную пользу от различных режимов адъювантной химиотерапии.
Предиктивная роль Ki-67 при назначении адъювантной химиотерапии при ЭР-негативном РМЖ обсуждалась в меньшем количестве публикаций. Несколько этих исследований были посвящены неоадъювантной терапии РМЖ, а остальные – адъювантной. В результате исследований Ring A.E. и соавт., а также Guarneri V. и соавт. было показано, что РЭ-негативные опухоли более чувствительны к химиотерапии, чем РЭ-позитивные опухоли [13, 19].
Предикторная роль Ki-67 при назначении
неоадъювантной терапии
Назначение неоадъювантной химиотерапии преследует цели улучшения исходов хирургического лечения, заключающиеся в уменьшении объема оперативного вмешательства и частичной девитализации опухоли. Кроме того, проведение предоперационной химиотерапии позволяет оценить лечебный патоморфоз проводимого лечения, таким образом, определить спектр препаратов для адъювантной терапии. На этом этапе также важен поиск клинических, биохимических и молекулярных прогностических факторов эффективности проводимой химиотерапии [4].
Предикторная роль Ki-67 при назначении гормональной терапии не столь описана, как в случае химиотерапии, однако некоторые авторы указывают на важность определения Ki-67 [4]. Оценка индекса Ki-67 при назначении гормональной терапии проводилась в рамках двух исследований: IMRACT, в котором сравнивалась эффективность неоадъювантной терапии анастрозолом, тамоксифеном и комбинации анастрозола и тамоксифена [5], а также исследования P024, в котором сравнивалось назначение летрозола с назначением тамоксифена в неоадъювантном режиме [8]. При сравнении индекса Ki-67 в данных исследованиях была показана корреляция между значениями супрессии индекса Ki-67 в процессе лечения и частотой рецидивирования после неоадъювантной гормонотерапии [5, 8]. В исследовании P024 было продемонстрировано, что индекс Ki-67 наряду с такими показателями, как размер опухоли, статус регионарных лимфатических узлов, экспрессия ЭР, является независимым предиктором общей и безрецидивной выживаемости [8].
На основании данных показателей сформирован предоперационный прогностический эндокринный индекс (PEPI), который является валидным предиктором долгосрочных исходов в исследовании IMPACT [5, 10]. В исследовании Ellis M.J. и соавт. было показано, что на основании PEPI могут быть выделены группы пациентов с низким риском рецидивирования после проведения гормональной терапии, для них назначение дополнительной химиотерапии не является обязательным этапом лечения. Также на основании данного индекса можно выделить группы пациентов, резистентных к гормональной терапии и нуждающихся в назначении химиотерапии [10].
Таким образом, к нулевой категории на основании подсчета индекса PEPI относятся опухоли размером после проведенного предоперационного лечения менее 5 см, при условии негативного статуса лимфатических узлов, уровне Ki-67 < 2,7% и РЭ >2. В данной группе пациенток в адъювантном режиме может быть продолжена эндокринная терапия, в то время как при показателях Ki-67 на уровне 10% пациенткам следует назначать химиотерапию. Вышеуказанные результаты были получены в когортном исследовании Z1031 [6, 10].
Данные результаты был подтверждены в крупных исследованиях ATAC и Breast International Group 1-98 trial, посвященных изучению тамоксифена, анастрозола и комбинации препаратов в адъювантном режиме [2, 22].
Сходные результаты были получены в исследовании Z1031, проведенном American College of Surgeons Oncology Group [9]. В нем сравнивалось назначение в нео­адъювантном режиме экземестана и назначение анастрозола. При сравнении эффективности терапии указанными препаратами различий в степени снижения индекса Ki-67 не было выявлено, результаты сопоставимы с итогами исследования NCIC CTG MA.27, в котором были получены сходные показатели выживаемости при терапии описанными препаратами в адъювантном режиме [12].
На основании результатов указанных исследований был выполнен ряд экспериментов, включающих 2-недельный курс неоадъювантной гормонотерапии. Конечной точкой исследования являлось определение значения индекса Ki-67 [12, 14, 20].
В исследовании Smith I.E. и соавт. оценивалась эффективность назначения комбинации гефитиниба и анастрозола, индекс Ki-67 рассматривался как первичная конечная точка исследования, которая являлась мерой ответа опухоли на терапию. В данном исследовании был показан положительный эффект гефитиниба как на показатели выживаемости, так и на степень снижения Ki-67 [21].
Ki-67 как конечная точка при исследовании фармакодинамики препаратов
Отсутствие снижения индекса Ki-67 в процессе лечения может быть предиктором неблагоприятного исхода. В исследовании IMPACT было продемонстировано, что Ki-67 является достоверным предиктором выживаемости при эндокринной терапии. Результаты 2-недельной эндокринной терапии показали, что время до прогрессирования коррелирует с уровнем Ki-67 до начала терапии. Согласно данным Dowsett M. и соавт., значение Ki-67 после вышеуказанной терапии может рассматриваться в качестве индекса резидуального заболевания после проведения эндокринной терапии. Важность определения индекса Ki-67 после 2 нед. нео­адъювантной эндокринной терапии была показана на примере исследования POETIC, в котором приняли участие 4 тыс. пациенток, получавших периоперационную эндокринную терапию [6].
Уровень Ki-67 и назначение
неоадъювантной химиотерапии
Ценность динамики изменения индекса Ki-67 в ходе неоадъювантной химиотерапии менее выражена, чем в случае эндокринной терапии. Снижение уровня Ki-67 происходит в большинстве случаев проведения нео­адъювантной химиотерапии, однако степень выраженности редукции данного признака коррелирует со степенью ответа [1]. В исследовании Jones R.L. и соавт. было показано, что отсутствие редукции уровня Ki-67 наряду с отсутствием полного патоморфоза являются предикторами неблагоприятного исхода заболевания [17].
Таким образом, опухолевый маркер Ki-67 является одним из наиболее востребованных в онкологии для морфологического определения степени злокачественности новообразования, одним из дополнительных критериев диагностики злокачественных новообразований и решения вопроса о виде дополнительного консервативного лечения в адъювантном и/или неоадъювантном режимах.

Читайте также:
Почему набухают, увеличиваются и болят грудные железы у женщин

Литература
1. Assersohn L., Salter J., Powles T.J. et al. Studies of the potential utility of Ki67 as a predictive molecular marker of clinical response in primary breast cancer // Breast Cancer Res Treat. 2003. Vol. 82 (2). Р. 113–123.
2. Baum M., Buzdar A., Cuzick J. et al. Anastrozole alone or in combination with tamoxifen versus tamoxifen alone for adjuvant treatment of postmenopausal women with early breast cancer: first results of the ATAC randomised trial Lancet. 2002. Vol. 359 (9324). Р. 2131–2139.
3. Cuzick J., Dowsett M., Wale C. et al. Prognostic value of a combined ER, PgR, Ki67, HER2 immunohistochemical (IHC4) score and the comparison with the GHI recurrence score—results from TransATAC // Cancer Res. 2009. Vol. 69. 503 р.
4. Dowsett M., Nielsen T.O., A’Hern R., Bartlett J., Coombes R.C., Cuzick J., Ellis M., Henry N.L., Hugh J.C., Lively T., McShane L., Paik S., Penault-Llorca F., Prudkin L., Regan M., Salter J., Sotiriou C., Smith I.E., Viale G., Zujewski J.A., Hayes D.F. International Ki-67 in Breast Cancer Working Group. Assessment of Ki67 in breast cancer: recommendations from the International Ki67 in Breast Cancer working group // J Natl Cancer Inst. 2011. Vol. 103 (22). Р. 1656–1664.
5. Dowsett M., Smith I.E., Ebbs S.R. et al. Short-term changes in Ki-67 during neoadjuvant treatment of primary breast cancer with anastrozole or tamoxifen alone or combined correlate with recurrence-free survival // Clin Cancer Res. 2005. Vol. 11 (2). Р. 951–958.
6. Dowsett M., Smith I.E., Ebbs S.R. et al. Prognostic value of Ki67 expression after short-term presurgical endocrine therapy for primary breast cancer // J Natl Cancer Inst. 2008. Vol. 99 (2). Р. 167–170.
7. Dressler L.G, Seamer L., Owens M.A., et al. Evaluation of a modeling system for S-phase estimation in breast cancer by flow cytometry // Cancer Res. 1987. Vol. 47 (20). Р. 5294–5302.
8. Ellis M.J., Coop A., Singh B. et al. Letrozole inhibits tumor proliferation more effectively than tamoxifen independent of HER1/2 expression status // Cancer Res. 2003. Vol. 63 (19). Р. 6523–6531.
9. Ellis M.J., Suman V.J., Hoog J. et al. ACOSOG Z1031, a randomized phase 2 neoadjuvant comparison between letrozole, anastrozole and exemestane for postmenopausal women with ER rich stage 2/3 breast cancer: clinical and biomarker outcomes // J Clin Oncol. 2011. Vol. 29 (17). Р. 2342–2349.
10. Ellis M.J., Tao Y., Luo J. et al. Outcome prediction for estrogen receptor-positive breast cancer based on postneoadjuvant endocrine therapy tumor characteristics // J Natl Cancer Inst. 2008. Vol. 100 (19). Р. 1380–1388.
11. Gerdes J., Lemke H., Baisch H., Wacker H.H., Schwab U. Cell cycle analysis of a cell proliferation-associated human nuclear antigen defined by the monoclonal antibody Ki-67 // J Immunol. 1984. Vol. 133 (4). Р. 1710–1715.
12. Goss P.E., Ingle J.N., Chapman J.-A.W. et al. Final analysis of NCIC CTG MA.27: a randomized phase III trial of exemestane versus anastrozole in postmenopausal women with hormone receptor positive primary breast cancer // Cancer Res. 2010. Vol. 70 (24). 75 р.
13. Guarneri V., Broglio K., Kau S.W. et al. Prognostic value of pathologic complete response after primary chemotherapy in relation to hormone receptor status and other factors // J Clin Oncol. 2006. Vol. 24 (7). Р. 1037–1044.
14. Guix M., Granja N. de M., Meszoely I. et al. Short preoperative treatment with erlotinib inhibits tumor cell proliferation in hormone receptor-positive breast cancers // J Clin Oncol. 2008. Vol. 26 (6). Р. 897–906.
15. Harris L., Fritsche H., Mennel R. et al. American Society of Clinical Oncology 2007 update of recommendations for the use of tumor markers in breast cancer // J Clin Oncol. 2007. Vol. 25 (33). Р. 5287–5312.
16. Hugh J., Hanson J., Cheang M.C. et al. Breast cancer subtypes and response to docetaxel in node-positive breast cancer: use of an immunohistochemical definition in the BCIRG 001 trial. // J Clin Oncol. 2009. Vol. 27 (8). Р. 1168–1176.
17. Jones R.L., Salter J., A’Hern R. et al. The prognostic significance of Ki67 before and after neoadjuvant chemotherapy in breast cancer // Breast Cancer Res Treat. 2009. Vol. 116 (1). Р. 53–68.
18. Penault-Llorca F., Andre F., Sagan C. et al. Ki67 expression and docetaxel efficacy in patients with estrogen receptor-positive breast cancer // J Clin Oncol. 2009. Vol. 27 (17). Р. 2809–2815.
19. Ring A.E., Smith I.E., Ashley S., Fulford L.G., Lakhani S.R. Oestrogen receptor status, pathological complete response and prognosis in patients receiving neoadjuvant chemotherapy for early breast cancer // Br J Cancer. 2004. Vol. 91 (12). Р. 2012–2017.
20. Robertson J.F., Nicholson R.I., Bundred N.J. et al. Comparison of the short-term biological effects of 7alpha-[9-(4,4,5,5,5-pentafluoropentylsulfinyl)-nonyl]estra-1,3,5, (10)-triene-3,17beta-diol (Faslodex) versus tamoxifen in postmenopausal women with primary breast cancer // Cancer Res. 2001. Vol. 61 (18). Р. 6739–6746.
21. Smith I.E., Walsh G., Skene A. et al. A phase II placebo-controlled trial of neoadjuvant anastrozole alone or with gefitinib in early breast cancer // J Clin Oncol. 2007. Vol. 25 (25). Р. 3816–3822.
22. Thurlimann B., Keshaviah A., Coates A.S. et al. A comparison of letrozole and tamoxifen in postmenopausal women with early breast cancer // N Engl J Med. 2005. Vol. 353 (26). Р. 2747–2757.
23. Tovey S.M., Witton C.J., Bartlett J.M., et al. Outcome and human epidermal growth factor receptor (HER) 1-4 status in invasive breast carcinomas with proliferation indices evaluated by bromodeoxyuridine labelling // Breast Cancer Res. 2004. Vol. 6 (3). Р. 246–251.
24. Tubiana M., Pejovic M.N., Chavaudra N., et al. The long-term prognostic significance of the thymidine labelling index in breast cancer // Int J Cancer. 1984. Vol. 33 (4). Р. 441–445.
25. Urruticoechea A., Smith I.E., Dowsett M. Proliferation marker Ki-67 in early breast cancer // J Clin Oncol. 2005. Vol. 23 (28). Р. 7212–7220.
26. Viale G., Regan M.M., Dell’Orto P. et al. Which patients benefit most from adjuvant aromatase inhibitors? Results using a composite measure of prognostic risk in the BIG 1–98 randomised trial // Ann Oncol. 2011. Vol. 22 (10). Р. 2201–2207.
27. Viale G., Regan M.M., Mastropasqua M.G. et al. Predictive value of tumor Ki-67 expression in two randomized trials of adjuvant chemoendocrine therapy for node-negative breast cancer // J Natl Cancer Inst. 2009. Vol. 100 (3). Р. 207–212.
28. Yerushalmi R., Woods R., Ravdin P.M., et al. Ki67 in breast cancer: prognostic and predictive potential // Lancet Oncol. 2010. Vol. 11 (2). Р. 174–183.

Читайте также:
Что показывает УЗИ грудной клетки

Контент доступен под лицензией Creative Commons «Attribution» («Атрибуция») 4.0 Всемирная.

Что означает индекс пролиферативной активности ki 67 при раке молочной железы

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия

Сравнение цифрового и визуального методов для оценки индекса Ki-67 в инвазивных карциномах молочной железы

Журнал: Архив патологии. 2018;80(2): 38-42

Кушнарев В. А., Артемьева Е. С., Кудайбергенова А. Г. Сравнение цифрового и визуального методов для оценки индекса Ki-67 в инвазивных карциномах молочной железы. Архив патологии. 2018;80(2):38-42.
Kushnarev V A, Artemyeva E S, Kudaybergenova A G. Comparison of digital and visual methods for Ki-67 assessment in invasive breast carcinomas. Arkhiv Patologii. 2018;80(2):38-42. (In Russ.).
https://doi.org/10.17116/patol201880238-42

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия

Цель исследования — cравнить два метода количественной оценки индекса пролиферативной активности (ИПА): визуального метода оценки несколькими исследователями и цифрового анализа изображений. Использование индекса Ki-67 в ежедневной клинической практике патолого-анатомического отделения связано с проблемой воспроизводимости количественной оценки ИПА Ki-67. В связи с развитием цифровых методов визуализации в морфологии предлагаются новые методы оценки ИПА с помощью цифрового анализа изображений (ЦАИ). Материал и методы. Сравнивали данные ИПА Ki-67, полученные при визуальной оценке и с помощью цифрового анализа изображений 104 случаев карцином молочной железы G2—G3. Препараты были отсканированы с помощью сканера гистологических препаратов Panoramic III (3D Histech, Венгрия) и получены цифровые изображения. ЦАИ проведен с помощью программного обеспечения 3D Histech QuantCenter (3D Histech, Венгрия) c разметкой 3—10 зон. Полученные препараты оценивали два исследователя онкопатоморфолога независимо друг от друга. Результаты. Уровень согласия между визуальным и цифровым методом анализа достоверно не отличался (p>0,001). Нами была выделена серая зона в пределах 10—35% ИПА, где значения индекса Ki-67 показали слабую связь между анализируемыми группами (ICC 0,47). Значения индекса Ki-67 ниже 10% и выше 35% показали достаточный уровень воспроизводимости в пределах одной лаборатории. Заключение. Считаем, что цифровая сканированная форма гистологического препарата, которую можно оценить, используя автоматические программные модули анализа, является независимым и объективным методом оценки пролиферативной активности для валидирования индекса Ki-67.

Читайте также:
Когда лучше делать УЗИ груди

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия

Для оценки пролиферативной активности опухоли в клинической практике наиболее изученным считается митотический индекс, оцениваемый по гистологическому препарату, и индекс Ki-67 — по иммуногистохимически окрашенному препарату. Эти методы имеют определенные ограничения и если оценка митотического индекса прочно вошла в классификационные диагностические схемы, то при определении индекса Ki-67 неоднократные попытки стандартизировать методические и технологические подходы приводили всегда к выводу о необходимости валидизации методики оценки в спланированных клинических исследованиях и слабой воспроизводимости этого признака в больших исследованиях с достаточным количеством лабораторий-участниц [1].

Поскольку оценка индекса пролиферативной активности (ИПА) по Ki-67 является прогностическим и предиктивным суррогатным маркером опухолей молочной железы, для стандартизации подходов в оценке ИПА по Ki-67 в клиническом ведении пациентов с карциномой молочной железы в марте 2010 г. была создана международная рабочая группа [1]. Целью рабочей группы явилось определение общей стратегии гармонизации на преаналитическом и постаналитическом этапе диагностики и методических подходов к унифицированной оценке ИПА по Ki-67.

Внедрение количественной оценки вместо традиционно принятой полуколичественной системы оценки в баллах (например, Allred) всегда является критическим этапом в применении метода. Внедрение ИПА Ki-67 с обязательной оценкой процентного соотношения позитивно окрашенных клеток в ежедневную практику патолого-анатомического отделения связано с проблемой воспроизводимости количественной оценки ИПА. В качестве суррогатного маркера ИПА используется для разделения ER-позитивного люминального, А (прогностически благоприятного) и В (прогностически неблагоприятного) подтипа карцином молочной железы. Пороговым уровнем разделения ИПА между этими двумя группами считается 14%, где соответственно люминальный тип, А содержит менее 14% Ki-67-позитивных клеток, люминальный тип В — более 14% Ki-67-позитивных клеток [2]. Кроме того, пороговый уровень индекса Ki-67 выше 15% важен для назначения адъювантной химиотерапии при люминальном В, но не люминальном А-подтипе карцином молочной железы.

Читайте также:
Что такое микрокальцинаты в молочной железе и их лечение

Ряд профессиональных сообществ, например Европейское общество патологов (European Society of Pathology — ESP), некоторые руководства [8] рекомендуют делать повторную оценку индекса Ki-67 c участием второго экспертного мнения или использовать цифровой анализ гистологических сканов, если ИПА находится в пределах от 10 до 35%, в так называемой серой зоне, по данным разных авторов [9]. Панель экспертов St. Galen [4] рекомендует исследователю при оценке окраски на Ki-67 ориентироваться на медиану ИПА по лаборатории с целью повышения воспроизводимости между исследователями. Следовательно, стандартизация измерения этого показателя независимо от квалификации патолога и уровня морфологической лаборатории необходима в лечебной тактике.

В связи с развитием цифровых методов визуализации в морфологии предлагаются новые методы оценки ИПА с помощью цифрового анализа изображений (ЦАИ) сканов гистологических препаратов. Предполагается, что автоматический анализ индекса Ki-67 является методом, способным заменить визуальную оценку ИПА и улучшить точность и воспроизводимость оценки.

Целью исследования являлось сравнение двух методов исследования ИПА: визуального метода оценки несколькими исследователями и цифрового анализа изображений. Мы не ставили перед собой цель проанализировать распределение ИПА Ki-67 по видам материала или сравнить виды материала между собой.

Материал и методы

Подготовка когорты пациентов

Из 3842 случаев, исследованных в лаборатории патологической анатомии НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова в период с июля по октябрь 2016 г., в 542 (14,2%) случаях проведено стандартное исследование индекса Ki-67. Распределение по формам заболевания было следующим (рис. 1):

Рис. 1. Распределение когорты пациентов, подвергнутых стандартному исследованию индекса Ki-67. 56% молочная железа, 12,8% женская половая система, 12% мягкие ткани, 6% пищеварительная система, 5,2% лимфатическая система, 4,4% дыхательная система, 3,6% метастатические поражения. Материал карциномы молочной железы (56% от числа исследований) выбран как наиболее часто используемый в практике лаборатории для оценки ИПА. Было проанализировано 104 случая инвазивных карцином молочной железы G2—G3, выбранных случайно (табл. 1). Таблица 1. Характеристика когорты пациентов, подвергнутых анализу

Фиксированный в формалине (24 ч), залитый в парафин материал резецированных карцином и трепанобиопсий молочной железы c инвазивной карциномой подвергался стандартному морфологическому исследованию с оценкой степени гистологической злокачественности. Иммуногистохимическое исследование пролиферативной активности Ki-67 (кроличьи моноклональные антитела, клон 30−9, CONFIRM, «Roche — Ventana») проведено, согласно протоколу (табл. 2)

Таблица 2. Протокол иммуногистохимического исследования при помощи автоматического стейнера BenchMark ULTRA («Ventana Medical Systems», США).

Полученные препараты оценивали два исследователя онкопатоморфолога независимо друг от друга. Исследователи обладали различным опытом в области оценки ИПА Ki-67. Препараты отсканированы с помощью сканера гистологических препаратов Panoramic III (3D Histech, Венгрия) и получены цифровые изображения. ЦАИ проведен с помощью программного обеспечения 3D Histech QuantCenter (3D Histech, Венгрия) c разметкой 3—10 зон (рис. 2)

Рис. 2. Примеры разметки зон в отсканированных гистологических препаратах (участки, выделенные синими линиями). Иммуногистохимическая окраска на Ki-67, ×10. независимым исследователем. Общая площадь аннотаций составляла не менее 1 мм 2 в каждом оцениваемом препарате. Оценка количества Ki-67-позитивных клеток проведена с использованием расчетного модуля CellQuant (QC).

Статистический анализ

Статистический анализ выполнен с помощью программного обеспечения R-studio, c применением Wilcoxon signed rank test, так как распределение в выборке отличалось от нормального. Показателем согласованности между значениями двух переменных служил коэффициент непараметрической корреляции r Спирмена, где r=1 обозначает максимально сильную положительную линейную взаимосвязь. Внутриклассовый коэффициент корреляции (Intraclass Correlation — ICC) использовали для выявления связи между методами оценки.

В качестве шкалы для обнаружения согласия (табл. 3)

Читайте также:
О чем говорит цвет выделений при мастопатии: зеленые, коричневые, кровяные

Таблица 3. Значения коэффициентов ICC, PAC для анализа связи между группами в полученных интервалах применены критерии для каппы Cohen и Fleiss [6]. Коэффициент воспроизводимости (Percent Agreement Coefficient — PAC) рассчитан для определения процента согласия между группами подсчета ИПА Ki-67. Все анализируемые случаи разделили на группы 0—10, 11—35 и 36—100% ИПА, где в качестве внутреннего стандарта сравнения для разделения на группы выступал модуль QC.

Результаты и обсуждение

Медиана ИПА по анализируемому материалу, согласно данным автоматического модуля анализа QC, составила 25,5% (табл. 4, рис.

Таблица 4. Медиана распределения ИПА Ki-67 по способам оценки 3). Рис. 3. Распределение ИПА Ki-67 в группах анализа.

Распределение ИПА во всех группах было близко к бимодальному. По степени злокачественности (G2—3) ИПА продемонстрировал высокие значения в grade 3 (табл. 5),

Таблица 5. Медианы распределения ИПА Ki-67 по степени злокачественности особенно в группе 1-го исследователя.

Медианы, полученные в границах 10—35% ИПА, находятся в интервале от 21 до 24%. Медиана серой зоны составила ~24% ИПА, оцененного с помощью цифрового анализа, группа QC (табл. 6).

Таблица 6. Распределение медиан ИПА Ki-67 в зоне 10—35% Данный интервал представляет четверть от всего количества исследованных случаев (28%).

Таблица 7. Коэффициенты корреляции и воспроизводимости в зависимости от способа оценки ИПА

При сравнении рекомендованных границ ИПА значения коэффициентов ICC, PAC показали наличие слабой связи при визуальном методе анализа между 1-м и 2-м исследователем в границах серой зоны 10—35% ИПА по сравнению со средней и сильной связью группы QC/1-й исследователь и QC/2-й исследователь соответственно в других пределах (табл. 8).

Таблица 8. Коэффициенты корреляции и воспроизводимости в зависимости от способа оценки ИПА Ki-67

Заключая, хотели бы сказать, что визуальная оценка индекса Ki-67 является воспроизводимым показателем вне пределов серой зоны. Статистическая обработка данных индекса Ki-67, полученного в результате визуальной оценки разными исследователями или автоматического анализа изображений, показала положительную корреляцию (r=0,89—0,92). Распределение ИПА в группе цифрового анализа выявило наличие серой зоны 10—35% ИПА, где существует недостаточная воспроизводимость между исследователями (ICC 0,47). Медиана серой зоны при оценке ИПА в карциномах молочной железы в нашем исследовании составила 24%, что коррелирует со значениями медианы зарубежных публикаций [3, 5, 8].

Значения ICC и PAC в серой зоне демонстрируют слабую связь между исследователями (см. табл. 8), что нередко приводит к диагностическим неточностям, так как порог 14—20% ИПА для разграничения люминального А- и В-подтипа карцином молочной железы находится в пределах серой зоны.

Низкие и даже отрицательные показатели ICC и PAC (см. табл. 8) в пределах от 0 до 10% связаны с большим внутригрупповым разбросом ИПА. Высокие значения коэффициента согласия (PAC) между цифровым анализом изображений и данными 2-го исследователя свидетельствуют о низком межгрупповом разбросе и характеризуют однородность выборки в интервале 0—10% ИПА. Возможно, это связано с более длительным опытом оценки ИПА 2-м исследователем.

В пределах 36—100% ИПА высокое значение PAC, коэффициента корреляции r в группах QC/1-й исследователь и QC/2-й исследователь подтверждает, что межгрупповое распределение ИПА достаточно хорошо соотносится как при визуальной оценке, так и при ЦАИ. В данном интервале полагаем, что цифровой анализ и визуальная оценка сопоставимы. Полученные данные свидетельствуют, что цифровой анализ способен служить одним из способов стандартизации исследования ИПА в предполагаемой границе до 35% и важен для внутрилабораторного контроля.

Анализ данных при помощи каппы воспроизводимости Cohen в модификации Fleiss [6] возможен только при наличии стандартизованного метода оценки ИПА, в качестве которого может выступать ЦАИ. Визуальная оценка с применением количественных методик требует выработки навыков оценки иммуногистохимических окрасок и определения границы стандарта, что считать достаточным уровнем воспроизводимости ИПА.

Мы рассматриваем возможность использования ЦАИ в качестве внешнего контроля и обучения патоморфологов для оценки ИПА. Для этого необходимо создание цифрового архива отсканированных изображений гистологических препаратов, который будет отвечать современным потребностям морфологической диагностики и клинической практики. Вне пределов серой зоны также необходимы цифровые архивы сканированных препаратов для обучения морфологов количественной оценке индекса Ki-67 в карциномах молочной железы. В пределах серой зоны рекомендуется использование ЦАИ из-за недостаточности показателей воспроизводимости и вследствие клинически обоснованной необходимости разделения на суррогатные подгруппы люминальных карцином.

Заключение

Распределение ИПА при цифровом методе анализа подтвердило границы серой зоны от 10 до 35% с медианой 24%. В данных границах наблюдалась недостаточная воспроизводимость между исследователями при визуальном методе анализа. Значения ИПА выше и ниже границы 10—35% показали достаточный уровень воспроизводимости между цифровым и визуальным методом анализа и являются сопоставимыми. На основании полученных результатов можно констатировать, что цифровой анализ изображений является одним из методов контроля воспроизводимости ИПА Ki-67 для исследователей.

Маркер бесконечности Ki-67

Белок Ki-67 — самый широко используемый маркер пролиферации как в нормальных, так и в опухолевых клетках. Впервые описан в 1983 году в Институте патологии в немецком городе Киль, где и были синтезированы первые антитела к нему в 67 лунке планшета [1].

Читайте также:
Помогает ли мастодинон при фиброзно-кистозной мастопатии и чем можно его заменить

Негистоновый белок Ki-67 кодируется геном MKI67. Он участвует в клеточном цикле, вовлекаясь в биогенез рибосом, организацию гетерохроматина и разделение митотических хромосом. Полный спектр его функций все еще неясен. Трудности исследования Ki-67 связаны с отсутствием гомологичных белков с уже известной функцией, а также с его большой молекулярной массой и высокой чувствительностью к разрушению протеазами [2].

Ki-67 обнаруживается в ядрах клеток во все активные фазы клеточного цикла: G1, S, G2, M. Ki-67 весьма «ветреный» белок: его распределение и количество вариабельно и зависит от конкретного момента жизни клетки (рис. 1) [3]. От фазы G1 к фазе М его количество увеличивается, достигая максимума во время метафазы митоза. В самом начале фазы G1 локализация Ki-67 совпадает с локализацией сателлитной ДНК в центромерах и теломерах хромосом. Далее при прогрессии фазы G1 эта колокализация исчезает. К середине фазы G1 белок Ki-67 начинает выявляться в ядрышках, затем, в фазу G2, — и в ядрышках, и в кариоплазме.
.

Антитела к Ki67 (зеленый) и DAPI для визуализации ДНК (синий). В фазу митоза Ki-67 покрывает конденсированные хромосомы в качестве основы перихромосомного слоя. Когда клетки вступают в раннюю фазу G1, маленькие точечные структуры Ki-67 покидают деконденсированные хромосомы. Затем в ходе G1-фазы Ki-67 перемещается на периферию ядрышка, покрывая перинуклеолярный гетерохроматин [3].

Но все меняется, когда происходит митоз. В профазу Ki-67 в виде тонкой сети связан с конденсированным хроматином. В метафазу эта сетчатая структура окружает уже отдельные хромосомы. После разрушения ядерной мембраны часть Ki-67 распределяется диффузно в цитоплазме. В анафазу и телофазу митоза количество Ki-67 в клетках начинает быстро снижаться.

При переходе клетки после митоза в фазу G0 Ki-67 быстро подвергается катаболизму (путем опосредованной протеасомами деградации) и перестает выявляться в ядрах интерфазных клеток [4].

Ki-67 также обнаруживается при гиперэкспрессии p53 и p21, вызванной блокированием репликации или повреждением ДНК [2].
Длительное время Ki-67 определялся как иммуногистохимический маркер, отражающий лишь активность пролиферации. Это обусловило его важную роль в классификации злокачественных новообразований, таких как рак молочной железы, нейроэндокринные опухоли и лимфомы [5]. Определение индекса Ki-67 является более чувствительным методом для оценки пролиферативной активности, чем подсчет фигур митоза, поскольку позволяет выявлять клетки во всех активных фазах клеточного цикла и уменьшает вероятность неверной интерпретации микроскопической картины. Переход патоморфологов в своей рутинной практике к расчету индекса пролиферации по уровню Ki-67 стал начальным этапом движения в сторону стандартизации и объективизации гистологических исследований. От двоичной системы «есть экспрессия» (1) / «нет экспрессии» (0) фокус сместился к оценке степени выраженности маркера в исследуемых образцах.

Индекс пролиферации — это процент клеток с ядерным окрашиванием от общего числа опухолевых клеток. Интенсивность и тип экспрессии маркера не учитывается (перинуклеолярный, нуклеоплазменный, перихромосомный). Подсчет включает в себя не менее 500 опухолевых клеток (в идеале не менее 1000) не менее чем в 3 полях зрения при увеличении ×400. В случае гетерогенности опухоли выбирают участки с наибольшей митотической активностью [6].

Общие характеристики уровня пролиферации для опухолевой ткани различных локализаций:

В лабораториях используют антитела к Ki-67 клонов MIB-1 (для работы с материалом, полученным от человека, крупного рогатого скота, собак, овец и лошадей) и MIB-5 (для работы с материалом, полученным от крыс и других грызунов). Эти структуры показали более высокое сродство к эпитопу антигена Ki-67 в условиях формалиновой фиксации доставляемого материала [2].

Особую значимость этот маркер приобрел при патоморфологическом исследовании опухолей молочной железы. Гистологический подтип гормон-позитивных люминальных опухолей определяется на основании индекса Ki-67: подтип А (Ki-67 < 20 %) и подтип В (Ki-67 ≥ 20 %) (рис. 2) [6].
.

Прогностические горизонты применения маркера Ki-67 постоянно расширяются. Уточняется и дополняется его значение в предикции результатов лекарственной терапии опухолей. Например, для рака молочной железы, который не отвечает на химиотерапию, повышение Ki-67 является плохим прогностическим маркером. Напротив, в опухолях, реагирующих на химиотерапию, этот эффект не наблюдается, и даже присутствует корреляция увеличения Ki-67 с улучшением прогноза.

Объяснение этому феномену можно логически вывести из понимания биологии каждого подтипа опухоли:

  1. Низко пролиферирующие опухоли хуже реагируют на химиотерапию, но в любом случае имеют хороший прогноз ввиду меньшей агрессивности (низкий Ki-67 — хороший результат).
  2. В тех высокопролиферирующих опухолях, которые чувствительны к терапии, высокий Ki-67 связан с большей частотой достижения полного патоморфологического ответа (pCR) и улучшением выживаемости (высокий Ki-67 — хороший результат).
  3. Но в высокопролиферирующих опухолях, которые при этом также являются резистентными к химиотерапии, увеличение индекса Ki-67 связано с уменьшением выживаемости: активно пролиферирующие клетки обусловливают агрессивное поведение опухоли, не контролируемое химиопрепаратами (высокий Ki-67 — плохой результат) [6].

В настоящее время методы иммуногистохимической детекции Ki-67 представляются в виде несколько упрощенной картины, как будто Ki-67 «включен» во время клеточной пролиферации (характерное коричневое окрашивание ядер) и «выключен» во время покоя и старения клетки (нет окрашенных ядер, может обнаруживаться в цитоплазме). Но важное клиническое значение может иметь также интерпретация факта неуклонного роста экспрессии Ki67 от фазы G1 к фазе М. Также выяснено, что чем дольше клетка находится в состоянии покоя, тем ниже будет уровень Ki-67 при повторном входе в клеточный цикл [5,7]. Для анализа этих данных требуются методы системной биологии с выведением формулы, позволяющей учесть все характеристики Ki-67 в доставленном материале. Это позволит более точно отразить пролиферативный статус клеток и определить клиническую стратегию. Ключевым моментом эффективности таких многофакторных алгоритмов является, несомненно, точность «сырых» данных. И здесь мы уже говорим о стандартизации патоморфологического исследования, которое в современной практике должно базироваться на цифровой обработке гистологических изображений.

Читайте также:
Как правильно перетянуть грудные железы, чтобы ушло молоко

Иммуногистохимическое исследование (ER, PR, her2neu, ki67, p53 и др)

Иммуногистохимическое исследование – особый вид исследования ткани, который предполагает использование специальных реактивов. При гистологическом исследовании материал, полученный при биопсии или после операции, окрашивают с помощью красителей. При иммуногистохимическом исследовании используют специальные реактивы, содержащие антитела, меченные специальными веществами. Антитело – белковое вещество, которое связывается в тканях с определенными участками (если они есть) – антигенами, после чего возникает реакция, по которой и можно судить, присутствует в ткани то или иное вещество или нет.

Иммуногистохимическое исследование основано на реакции антиген-антитело. Такие реакции каждый день происходят в организме. Например, при попадании чужеродного вещества в организм человека у него образуется в крови антитела, которые связывают чужеродный агент. На основе этой реакции работает вакцинация (сначала в организм вводят антигены – очищенные частицы микробов и организм вырабатывает антитела, а при попадании инфекции эти антитела связывают чужеродные микроорганизмы).

При иммуногистохимическом исследовании используются сыворотки, содержащие антитела, которые связываются с этими факторами, после чего возникает реакция, по которой и можно судить о наличии их в опухоли. Можно привести “бытовой пример” на бумагу нанесен прозрачный клей. При обычном рассмотрении листа он малозаметен, но стоит только присыпать его мелким песком, как становится виден рисунок, за счет прилипающих частиц песка.

В результаты многочисленных исследований ученые обнаружили в опухолях ряд факторов, которые связаны с прогнозом заболевания и ответом на лечение. К таким факторам относятся рецепторы к эстрогенам ( ER ) , рецепторы к прогестерону ( PR ) , ki -67 (маркер активности опухоли), her 2 neu ( определяет чувствительность опухоли к трастузумабу/герцептину), VEGF (сосудистый фактор роста), Bcl -2, р53 и др.

Все эти факторы могут содержаться в опухоли. Однако при обычном гистологическом исследовании их невозможно определить.

Иммуногистохимическое исследование проводится в лаборатории. Для его проведения необходима опухолевая ткань, которую обычно получают при биопсии или после операции. Выполняется тонкий срез ткани (обычно она залита в парафин) после чего производится окрашивание с помощью специальных реактивов.

Для иммуногистохимического исследования используется ткань, полученная при биопсии или после операции. При раке молочной железы наиболее часто используется материал биопсии. Очень важно, чтобы материал был получен до начала лечения, в противном случае результаты могут быть искажены.

Иммуногистохимическое исследование в настоящее время имеет одно из кардинальных значений в выборе тактики лечения, выборе самого лечения. Данные исследования помогают врачу подобрать наиболее эффективное лечение и позволяют оценить прогноз заболевания.

Рецепторы к эстрогену и прогестерону – это белковые вещества, которые располагаются на поверхности опухолевой клетки. При воздействии на них женских половых гормонов образуется комплекс, который стимулирует опухоль к размножению. Несмотря на то, что гормонотерапия рака молочной железы была открыта задолго до обнаружения этих рецепторов, после их открытия показания к использованию этого метода лечения были существенно уточнены, в связи, с чем эффективность его существенно возросла. А такие препараты как тамоксифен и фарестон (группа антиэстрогенов) воздействует именно на эти рецепторы, блокируя их, не давая опухолевой клетке размножаться. Наличие в опухоли рецепторов к эстрогенам и прогестерону связано с лучшим прогнозом по отношению к опухолям, которые не содержат данные рецепторы.

Her 2 neu ( протоонкоген, кодирующий рецептор 2 человеческого эпидермального фактора роста c – erb В- 2) . Гиперэкспрессия (увеличенное содержание) этого фактора отмечается в 25-30% случаев рака молочной железы и ассоциируется с плохим прогнозом при наличии метастазов опухоли в регионарных лимфоузлах. Данный фактор определяет чувствительность опухоли к трастузумабу (герцептину) – одному из современных и эффективных препаратов в лечении рака молочной железы.

Ki 67 является маркером пролиферации, то есть “определителем скорости деления опухолевой клетки”. Данный параметр оценивается в процентах. При ki 67 менее 15% опухоль считается менее агрессивной, при показателе более 30% опухоль считается высоко агрессивной. ki 67 является предсказывающим фактором. Так при высоком уровне данного фактора опухоль с более высокой вероятностью ответит на химиотерапевтическое лечение. При низком уровне данного показателя опухоль в большей мере отреагирует (при наличии позитивных рецепторов к эстрогенам и прогестерону) на гормонотерапию.

Читайте также:
Красное пятно на груди у женщины болит, чешется, облазит

В настоящее время в рутинной практике широко используются определение рецепторов к эстрогенам и прогестерону ( ER PR ), her 2 neu , ki 67 .

Люминальный А – рецепторы к эстрогенам и/или прогестерону положительные, her2neu – негативный, Ki67 менее 14 процентов. Люминальный B (her2neu негативный) – Her2neu негативный, рецепторы к эстрогенам или прогестерона положительные, ki67 – высокий, Люминальный B (her2neu позитивный) – Her2neu позитивный, рецепторы к эстрогенам или прогестерона положительные, ki67 – высокий. erb-B2 сверхэкспрессирующий (her2neu позитивный, рецепторы к эстрогенам и прогестерону отрицательные. Базальноподобный или трижды негативный (рецепторы к эстрогенам и прогестерону – негативные, her2neu – негативный).

Что означает индекс пролиферативной активности ki 67 при раке молочной железы

ГлавнаяHelixbook Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование с определением пролиферативной активности по экспрессии KI-67

Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование с определением пролиферативной активности по экспрессии KI‑67

Исследование ткани с помощью специальных реактивов по принципу антиген-антитело. Ki-67 – маркер пролиферативной активности опухолевой клетки. Он оценивается в процентах и показывает, какой процент опухолевых клеток активно делится. Является фактором прогноза опухолевого заболевания и ответа опухоли на химиотерапевтическое лечение. Чем ниже показатель Ki-67, тем хуже опухоль реагирует на химиотерапевтическое лечение (и наоборот). Низкий уровень экспрессии гладкомышечного актина в строме новообразований и в стенках сосудов характерен для низкодифференцированных раков и опухолей с более высоким метастатическим потенциалом.

  • Гистологическое исследование с определением пролиферативной активности по экспрессии KI-67
  • Иммуногистохимическое исследование с определением пролиферативной активности по экспрессии KI-67

Синонимы русские

ИГХ, иммуногистохимическое исследование ткани, исследование образца опухолевой ткани, исследование ткани опухоли.

Метод исследования

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Локализация б/м: образец ткани (биоптат) опухолевого образования любой локализации.

Общая информация об исследовании

Антиген Ki-67 представляет собой специфический белок, находящийся в ядерном материале опухолевой клетки, и является необходимым для осуществления ее пролиферации, т.е. деления. Обнаружение Ki-67 указывает на опухолевые клетки, которые находятся в фазе деления клеточного цикла. Это позволяет понять, насколько активно и быстро происходит деление опухолевых клеток, а следовательно, и скорость роста новообразования, оценить риск метастазирования, определиться с тактикой терапии и вероятным ответом на нее, прогнозом заболевания.

Считается, что выявление маркера Ki-67 наиболее показательно при раке молочной железы, однако ряд исследований доказывает целесообразность проведения анализа при раке любой локализации, при подозрении на злокачественный процесс, а также при наличии доброкачественных новообразований с оценкой риска их озлокачествления.

Совместное гистологическое и иммуногистохимическое исследование опухолевого материала позволяет сначала получить морфологическое описание процесса, а затем определить его пролиферативную активность – степень и скорость деления клеток. Это дает достаточно точную и объективную оценку степени злокачественности опухоли и прогноз ее дальнейшего развития.

Гистологическое исследование проводится путем изучения срезов опухолевого материала под микроскопом после предварительного окрашивания, которое позволяет выявить и описать отклонения от нормы в структуре ткани, дать характеристику изменениям и сделать вывод о доброкачественности или злокачественности процесса. Далее проводится иммуногистохимическое исследование (ИГХ), направленное на выявление активности роста опухоли. В ходе ИГХ в образец патологической ткани, имеющей в своем составе клетки с антигенами Ki-67, добавляют специально синтезированные меченые антитела. В процессе реакции образуется комплексы “антиген-антитело”, доля которых свидетельствует о количестве клеток, находящихся в активной фазе деления. В заключении указывается индекс Ki-67 – индекс пролиферативной активности, выраженный в процентах. При низких значениях индекса опухоль считается менее агрессивной, при высоких – высокоагрессивной. Также по индексу пролиферативной активности можно судить о возможном ответе опухолевого процесса на терапию, оценить эффективность уже проведенного лечения.

Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование опухолевого процесса является достаточно сложным и трудоемким анализом. Однако объективность и целесообразность его проведения оправдана точными результатами диагностики, наиболее верным выбором терапии и ответом на нее, более качественным прогнозом течения заболевания.

Для чего используется исследование?

  • Морфологическое описание опухолевого процесса;
  • определение пролиферативной активности (скрытого потенциала деления клеток и увеличения в размерах новообразования);
  • верификация наличия опухолевого процесса и его доброкачественности/злокачественности;
  • прогноз дальнейшего течения процесса;
  • подбор наиболее адекватного и объективного метода лечения/выбор терапии;
  • контроль эффективности проведенной терапии.

Когда назначается исследование?

  • При наличии ракового процесса любой локализации;
  • при наличии доброкачественного образования для исключения озлокачествления;
  • при подборе и контроле терапии.

Что означают результаты?

Результат исследования представляет собой морфологическое описание препарата и подсчет количества клеток, имеющих или не имеющих антиген Ki-67. Высчитывается индекс пролиферативной активности (процент клеток с наличием экспрессии белка Ki-67). Интерпретация полученного результата проводится врачом, назначившим исследование, в зависимости от локализации опухолевого процесса, его типа, проведенного лечения и т.д.

Рейтинг
( Пока оценок нет )
Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: